Содержание
- - Как очистить с помощью колоночной хроматографии?
- - Как подготовить колонку?
- - Какие основные меры предосторожности необходимо соблюдать при проведении колоночной хроматографии?
- - Каков основной принцип колоночной хроматографии?
- - Что такое коэффициент очистки?
- - Что бы произошло, если бы колонке разрешили работать всухую?
- - Какая насадка обычно используется в колонке?
- - Что может пойти не так в колоночной хроматографии?
- - Почему при колоночной хроматографии плохие пузырьки воздуха?
- - Сколько диоксида кремния вы используете в колонке?
Как очистить с помощью колоночной хроматографии?
Колоночная хроматография обычно используется как метод очистки: она выделяет желаемые соединения из смеси. Смесь, которую необходимо проанализировать с помощью колоночной хроматографии, помещают в верхнюю часть колонки. Жидкий растворитель (элюент) пропускается через колонку самотеком или применение давления воздуха.
Как подготовить колонку?
Столбец подготовлен упаковка твердого абсорбента в цилиндрическую стеклянную или пластиковую трубку. Размер будет зависеть от количества выделяемого соединения. В основании пробирки находится фильтр, либо пробка из ваты, либо стекловата, либо стеклянная фритта для удержания твердой фазы на месте.
Какие основные меры предосторожности необходимо соблюдать при проведении колоночной хроматографии?
Загрузите и запустите хроматографическую колонку
Только когда вы будете готовы запустить колонку, загрузите образец, нанеся его пипеткой на уплотненный твердый слой. После загрузки образца влейте элюент и сразу же запустите поток. Не допускайте высыхания колонны и не останавливайтесь на середине бега..
Каков основной принцип колоночной хроматографии?
Принцип колоночной хроматографии: адсорбция, в котором смесь компонентов, растворенных в подвижной фазе, вводится в колонку, и компоненты перемещаются в зависимости от их относительного сродства. Выбор растворителя зависит от характеристик растворимости смеси.
Что такое коэффициент очистки?
Коэффициент очистки (PF) определяли как соотношение между удельной активностью фермента (Ед / мг) в ресуспендированном осадке и в сыром ферменте (Ед / мг), соответственно.
Что бы произошло, если бы колонке разрешили работать всухую?
Если вы позволите колонке высохнуть кремнезем начнет трескаться, и вы получите плохое разделение ваших соединений. При работе с колонкой никогда не позволяйте уровню растворителя опускаться ниже уровня силикагеля, иначе вы получите плохие результаты.
Какая насадка обычно используется в колонке?
Глинозем активности II или III, 150 меш, используется чаще всего. В описанных ниже методах насадки колонны в качестве неподвижной фазы используется диоксид кремния, но они в равной степени подходят для использования с оксидом алюминия.
Что может пойти не так в колоночной хроматографии?
Ошибки новичка:
| Ошибка | # Новички |
|---|---|
| Забыл закрыть ручку колонки, и кремнезем высыхает. | 612 |
| Слишком быстрое изменение полярности системы растворителей во время работы колонки, резкое растрескивание кремнезема | 387 |
| Смешайте фракции из флэш-колонки, объединив хорошо очищенный продукт с хорошо отделенными примесями. | 316 |
Почему при колоночной хроматографии плохие пузырьки воздуха?
В частности, пузырьки воздуха являются врагом практической ВЭЖХ и ионной хроматографии. Они могут вызвать сдвиг времени удерживания, пульсирующие базовые линии, неожиданные изменения площадей пиков, неправильные формы пиков, сбои в работе насоса и чрезмерно высокое противодавление.
Сколько диоксида кремния вы используете в колонке?
Однако на практике большинство людей выбирают размер столбца, который позволяет им заполнять столбец. примерно от одной трети до половины полного кремнезема - без бачка для растворителя (рис. 6).
Интересные материалы:
Что производит Лукойл?
Что прописывают врачи при потливости?
Что проще 2х2 или 3х3?
Что проще всего перевернуть?
Что противоположно объему?
Что противоположно однояйцевым близнецам?
Что противоположно полю боя?
Что противоположно предвиденному?
Что противоположно профи?
Что противоположно роумингу?